
在上一期視頻,我們聊到了生物制品支原體快檢,qPCR試劑盒選擇的兩個(gè)重要事項(xiàng):
第一、一定要選檢測結(jié)果更精確的探針法試劑盒,第二、一定要選不需要樣品富集前處理,取樣后直接可以上手檢測的試劑盒,這樣能夠簡單快捷,保證實(shí)驗(yàn)精準(zhǔn)、可重復(fù)性高,避免返工。
今天,我們繼續(xù)分享支原體qPCR檢測試劑盒選擇的另外兩個(gè)重要細(xì)節(jié),讓你選對試劑盒,實(shí)驗(yàn)真正又快又準(zhǔn)。
首先要提前弄清,其中的核心試劑是液態(tài)還是凍干粉。
有的試劑盒核心試劑是液態(tài),全程需要-20℃冷凍保存,不但運(yùn)輸、儲存麻煩,而且更容易因?yàn)闇囟鹊牟▌佣斐稍噭┬r(jià)衰減、靈敏度下降,進(jìn)而造成實(shí)驗(yàn)數(shù)據(jù)偏差。
相比之下,凍干粉劑型是更優(yōu)選擇,只需2–8℃冷藏,運(yùn)輸更簡單,關(guān)鍵是試劑穩(wěn)定性更好,對實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性與一致性更有保障。
當(dāng)然這個(gè)劑型的優(yōu)劣原理大家都懂,但由于技術(shù)的差異,也不是每個(gè)廠家都能把試劑做成凍干粉,所以核心試劑是凍干粉的試劑盒,事實(shí)上擁有更高的技術(shù)含量。快檢支原體試劑盒中,核心試劑是凍干粉的優(yōu)秀范例,就是德國MB生產(chǎn)的名為:VenorGem qEP Kit的一款試劑盒。
另一個(gè)注意事項(xiàng)就是,qPCR試劑盒和qPCR儀的適配性。當(dāng)然這個(gè)試劑盒能配適的儀器品牌越多越好,但有的qPCR試劑盒由于擴(kuò)增程序、熒光通道、反應(yīng)體系僅針對1-2款特定熒光定量PCR儀優(yōu)化,如果跨品牌、跨機(jī)型,極易出現(xiàn)擴(kuò)增效率低下、熒光信號弱、結(jié)果判讀不準(zhǔn)等問題。所以能配適所有主流機(jī)型的試劑盒,不僅使用起來方便,也說明了試劑盒中運(yùn)用的技術(shù)含量越高。其中典型的代表就是德國MB公司生產(chǎn)的貨號為11-9100的試劑盒。
總結(jié)干貨,我們以全球生物項(xiàng)目一邊倒地青睞的德國MB公司生產(chǎn)的VenorGem qEP Kit(貨號11-9100)為例,總結(jié)優(yōu)秀試劑盒的選擇要點(diǎn):
1,高特異性探針法,
2,樣品無需前處理,僅需200μL樣本即可完成檢測;
3,核心試劑為高品質(zhì)凍干粉劑型,
4,全主流熒光定量PCR儀全覆蓋適配。
細(xì)節(jié)決定成敗,選對試劑盒,讓你實(shí)驗(yàn)真的有準(zhǔn)又快。
你們實(shí)驗(yàn)室怎樣檢測支原體,踩過哪些坑,快來評論區(qū)說一說吧。
一次一個(gè)小妙招,讓生物實(shí)驗(yàn)更順暢!